hanks溶液是现配现用吗?
Hanks液是生物医学试验中常见的平衡盐溶液(BSS)之一,简称HBSS。主要用于配制培养液,稀释剂和细胞清洗液,而不能单独作为细胞,组织培养液。D-Hank's与Hank's的一个主要区别在于前者不含有钙和镁离子,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。
注意事项:
1.BSS的pH值应确定为7.2左右。
2.如配制的Hanks液高压灭菌后液体变混,则可将100 mL的CaCl2与含有其他成分的液体分别装瓶高压灭菌之后,再在无菌条件下配制,定容。这样可以避免高压灭菌后液体变混。
3.胰酶受热易失活,所以尽量避免盛夏配制,并且在配制过程中温度应始终保持在4℃左右。
4.胰酶研磨要充分,否则在过滤时会将较大的颗粒过滤掉,不能达到真正的浓度。
5.胰酶分装时尽量分装成多瓶,并遵守3次左右用完和只装2/3体积的原则。因为冷冻保存时体积会膨胀,而多次使用同一瓶胰酶反复冻融会降低消化效果并可能造成污染。
hanks溶液无酚红怎么配?
甲液:Na2HPO4•2H2O
0.06克
KH2PO4
0.06克
MgSO4•7H2O
0.20克葡萄糖
1.00克
NaCl
8.00克三蒸水
750毫升
乙液:CaCl2
0.14克三蒸水
100毫升
①将乙液徐徐加入甲液中。②将0.35克NaHCO3溶解在37℃
100毫升三蒸水中。③用数滴NaHCO3液溶解0.02克酚红。④将②、③液移入①液中。⑤用三蒸水定容至1000毫升,充分混匀,4℃冰箱过夜。⑥滤过消毒,小瓶分装,冷藏。
注意:酚红对细胞有一定毒性,目前实验中的用量除0.02克外,还有0.01克和0.005克,也有BSS液中不加酚红的。酚红量不同,BSS颜色也不同。
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